背景介绍

癌症是全球头号疾病之一。伴随人口老龄化趋势，在世界范围内，每年新增确诊癌症患者数量近两千万，且在逐年增长，以乳腺癌、肺癌、消化道癌症为最。随着对癌症研究的深入，以及如靶向疗法、免疫疗法、细胞疗法等治疗手段的革新，癌症患者的生存期被大大延长，生活质量也得到显著提升，使得癌症有“慢性病化”的发展趋势。而伴随这一趋势，肿瘤耐药问题显得越发重要。

肿瘤的耐药

癌症的抗药，就是患病者在介绍一个多段精力的的制疗，内部的的癌症团队内部对原本有制疗方案有承受，使其的制疗回报大幅度降低清零，几率会导致重大慢性病现况的迹象整个过程中。抗药力的有几率是因此患病者内部的本身就来源于对原本有制疗方案不皮肤敏感的癌症内部群，经的制疗挑选后得到 幸存强大，影响再发作，也几率是在的制疗整个过程中中，伴随着染色体组改善、表观遗传基因学改善、产生及免疫抗体改善等带动元素效果，激发癌症内部得到 对东盟体育 制疗方案的承受特性，影响重大慢性病现况。

耐药的发生具有普遍性和个性化特点，即对于各类东盟体育 或疗法都有可能产生耐药问题，且造成耐药发生的机制原理因病人而异。目前经研究，造成肿瘤细胞产生耐药的机理包括但不限于以下方面：

图1. Mechanisms of Drug Resistance.🌄 (Vrinda Gote et al. International Journal of Molecular Sciences 20211)

东盟体育 的耐药模型开发

关键在于更高地科学研究要了解的不同类形东盟体育 抗药性基理，并制定方案相关的积极应对思路，联合制作创新防癌东盟体育 与治疗办法，抗药性对型号的联合制作创造出一个更显得至关比较重要。在东盟体育 ，现下东盟体育 分为东盟体育 碰撞介导的办法，共性赫赛汀（Herceptin）、奥希替尼（Osimertinib）、阿贝西利（Abemaciclib）和索托拉西布（Sotorasib）这四款防癌东盟体育 创造出一个了相关的抗药性对型号。

所选东盟体育 简介

曲妥珠单抗（Trastuzumab），商用名称：赫赛汀（Herceptin®），由基因泰克（Genentech）公司开发，于1998年获得FDA审批，用于治疗人表皮生长因子受体2阳性（HER2+）的转移向乳腺癌患者，常与紫杉醇联用，是第一款被批准的酪氨酸激酶抑制剂，也是第一个成功以生物标志物为指导的癌症东盟体育 。

奥希替尼（Osimertinib），商用名称：泰瑞沙（TAGRISSO®），由阿斯利康（AstraZeneca）公司开发，于2015年获得FDA审批，是第三代表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（EGFR-TKI），用于治疗具有EGFR^T790M突变特征的局部晚期或转移性非小细胞肺癌患者。

𒀰阿贝西利（Abemaciclib），商用名称：唯择（Verzenio®），由礼来（Eli Lilly）公司开发，于2017年获得FDA审批，作为新型靶向CDK4/6抑制剂，用于治疗激素受体阳性（HR+）、人表皮生长因子受体2阴性（HER2-）的局部晚期或转移型乳腺癌患者。

索托拉西布（Sotorasib，AMG510），商用名称：LUMAKRAS®，由安进（Amgen）公司开发，于2021年获得FDA审批，作为第一款靶向KRAS^G12C突变的RAS GTPase抑制剂，用于治疗高阶或转移性非小细胞肺癌患者，而此前KRAS^G12C一直被认为是无法成药的靶点。2023年12月，因在PFS关键指标上，未获得体现其相对于化疗单臂的显著性收益结果，FDA拒绝完全批准LUMAKRAS®用于治疗既往至少接受一次全身治疗的KRAS^G12C突变非小细胞肺癌患者。

耐药模型的构建策略

构建策略上，东盟体育 采用对体外细胞给予东盟体育 暴露冲击诱导的方式，来模拟临床病人接受治疗后的获得性耐药产生过程。

具体而言，东盟体育 结合了脉冲式（Pulsed）与连续式（Continuous）给药冲击方式：脉冲式给药采用单次4~6小时高浓度东盟体育 暴露，模拟临床病人接受治疗时的东盟体育 代谢与暴露情况；接受脉冲式东盟体育 冲击后，细胞将继续在低浓度的东盟体育 暴露条件下生长，以维持其产生的耐药性不丢失。经过多轮东盟体育 冲击后获得的耐药细胞模型，将与原始的野生型细胞进行对比，以其体外药敏检测的IC50值的比值，即RF值，为判断标准，来衡量耐药性的强弱，并以此作为耐药模型构建成功与否的评价标准。参考McDermott et al.2等同行工作，东盟体育 将RF值>5作为判定耐药模型构建成功的标准。

在完成勾勒身体外耐药性肺结核神经体细胞系后，东盟体育 进那步在免疫体细胞常见问题小鼠上身勾勒耐药性肺结核神经体细胞系的胚胎移植瘤整治，探讨测评成瘤事情及其其对受试东盟体育 的接受特征。

构建成果

1. 赫赛汀

在赫赛汀耐药模型构建方面，东盟体育 选择了具有ER+/HER2+特征的BT-474人乳腺癌细胞系，通过东盟体育 冲击诱导的方式，成功构建了赫赛汀的耐药模型。体外药敏检测结果显示，原始野生型IC50值为0.693 μg/mL，耐药型IC50值提高到174.5 μg/mL，RF值为251.8（图2a）。在体内药效评价实验中，野生型移植瘤模型的肿瘤抑制率（%TGI）值为85.11，耐药型移植瘤的肿瘤抑制率降低为52.57（图2b）。

图2.BT-474_赫赛汀耐药肺结核模形检测英文报告結果: a) 身体外药敏的检测检测英文报告結果；b) 机体成瘤与效果检测英文报告結果.

2. 奥希替尼

在奥希替尼耐药模型构建方面，东盟体育 选择了具有EGFR^L858R/T790M突变特征的NCI-H1975人非小细胞肺癌细胞系，通过东盟体育 冲击诱导的方式，成功构建了奥希替尼的耐药模型。体外药敏检测结果显示，原始野生型IC50值为65.9 nM，耐药型IC50值提高到10940 nM，RF值为166（图3a）。在体内药效评价实验中，野生型移植瘤模型的肿瘤抑制率（%TGI）值为93.72，耐药型移植瘤的肿瘤抑制率降低为70.05（图3b）。

图3. NCI-H1975_奥希替尼抗药性仿真模型调查毕竟: a) 身体药敏检则调查毕竟；b) 体里成瘤与药力调查毕竟.

3. 阿贝西利

在阿贝西利耐药模型构建方面，东盟体育 选择了具有HER2-特征的MCF-7人乳腺癌细胞系，通过东盟体育 冲击诱导的方式，成功构建了阿贝西利的耐药细胞系模型。体外药敏检测结果显示，原始野生型IC50值为0.2536 μM，耐药型IC50值提高到1.649 μM，RF值为6.5（图4）。MCF-7的体内移植瘤模型在成瘤方面上表现不佳，因而体内数据未做展示。

图4. MCF-7_阿贝西利耐药性血细胞系休外药敏测量實驗然而.

4. 索托拉西布

在索托拉西布耐药模型构建方面，东盟体育 选择了具有KRAS G12C突变特征的NCI-H358人非小细胞肺癌细胞系，通过东盟体育 冲击诱导的方式，成功构建了索托拉西布的耐药细胞系模型。体外药敏检测结果显示，原始野生型IC50值为19.99 nM，耐药型IC50值提高到350.2 nM，RF值为17.52（图5a）。NCI-H358体内耐药模型构建与验证实验尚在进行中。

额外，东盟体育 在Calu1小鼠体细胞系迁移瘤3d模式上，经过不断东盟体育 裸漏冲洗分析的方试，构筑了索托拉西布的Calu1迁移瘤抗药性3d模式，其抗药性呈现如同5b如图所示。

图5.索托拉西布抗药肺结核性型号检测报告导致: a) NCI-H358_索托拉西布抗药肺结核性组织细胞系身体之外药敏判断检测报告导致；b) Calu1抗药肺结核性试管移植瘤型号体中效果检测报告导致.

参考文献：

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